| 1.採檢須知 |
(1)檢體／採檢容器：血液（血漿）／14號珍珠白蓋管(K2EDTA tube)
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| (2)建議採檢量：5 mL
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| (3)採檢注意事項(病人準備)：無
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| 2.檢體傳送要求 |
傳送注意事項：採檢後以室溫立即傳送，如無法於6小時內送達實驗室請先自行離心，將血漿分離，保存於2-8℃於採檢後3天內冷藏送檢。(有seperating gel血漿檢體則不需分離)。
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| 3.退件條件 |
(1)(1)符合一般退件條件，請參閱檢驗資訊查詢系統檢體採集原則【LAB-Manual-2.採檢手冊】一般退件條件。
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(2)特殊退件條件：
非HCV基因型1b者。
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| 4.檢體之儲存條件 |
(1)傳送前儲存條件：
採檢後以室溫立即傳送，如無法於6小時內送達實驗室請先自行離心，並保存於2-8℃冰箱(最多3天)。
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(2)檢體上機(檢驗)前儲存條件：
收件後如無法立即操作，分裝保存於-70℃冰箱於採檢後2週內完成操作。
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(3)檢驗後檢體儲存條件：
(A)剩餘核酸暫存於-20℃冰箱2週
(B)剩餘的血漿保存於-70℃冰箱6個月
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| 5.追加(requesting additional) /複驗(repeat)條件 |
符合檢體儲存條件者
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| 6.進一步檢驗(reflex additional examination) |
無
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| 7.受理時間 |
24小時
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| 8.報告時效 |
(1)送驗時已知基因型別為1b:14天 (2)送驗時基因型別未知且同時開立HCV Genotyping:21天 (3)送驗時基因型別未知且未同時開立HCV Genotyping:14天
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| 9.檢驗方法 |
RT-Nested PCR +定序分析
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| 10.生物參考區間 |
L31M、L31V、Y93 H、Y93C、Y93N : Not detected
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| 11.適應症 |
針對感染HCV-1b型病人，檢測是否有NS5A Inhibitor之抗藥性基因突變
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12.臨床意義 |
(1)HCV為RNA病毒，分成1~6基因型(genotype)，可進一步再區分成數十種亞型(subtype)，不同的基因型抗病毒藥物的感受性也不相同。在台灣，HCV以基因亞型1b的感染約佔50~70%，是最為廣泛基因亞型。
(2)近年開發主要針對的HCV-1b基因型的C肝新藥Daclatasvir及Asunaprevir，主要效能為直接結合到HCV NS5A，進而抑制病毒RNA的複製。臨床試驗結果顯示：併用Daclatasvir及Asunaprevir對HCV-1b基因型的療效可達8~9成；但若病毒的NS5A基因發生突變，導致第31及93位置胺基酸序列有變異時，藥物療效就會降到4成。常HCV基因胺基酸序列在31為L(Leucine)，突變時為M(Methionine)或V(Valine)﹔序列在93為Y(Tyrosine)，突變時為H(Histidine)或C(Cysteine)或N(Asparagine)。
(3)因此，在C型肝炎患者使用該藥治療前，應先檢驗病毒基因型，並用定序法確認NS5A基因沒有突變，才能發揮最大的效用；若有NS5A突變，則不建議使用Daclatasvir及Asunaprevir併用治療。
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| 13.執行組別 |
(1)執行組別:品管教研組，(2)聯絡電話:04-8381456分機1045
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| 14.其他 |
檢驗報告備註：
(1) Method: RT-Nested PCR and gene sequencing
(2) Target gene: HCV NS5A
(3) Limit of detection (Y93 H): 500IU/mL
(4) Reference: Naturally occurring resistance mutations to inhibitors of HCV NS5A region and NS5B polymerase in DAA treatment-naive patients. Paolucci et al. Virology Journal 2013， 10:355 Published online 2013 Dec 17. doi: 10.1186/1743-422X-10-355
委託彰化基督教醫院代檢
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| 15.資料來源 |
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| 16.生效日期 |
2017/7/24
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